本试剂盒仅供科学研究使用,严禁用于医学诊断。人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样品、标准品以及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。后续使用底物TMB显色,在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,并在酸的作用下进一步变为黄色。样品中adropin(AD)的浓度与显色的深浅呈正相关。最终在450nm波长下使用酶标仪测定吸光度(OD值),以计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法如下:
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激,血液采集后应迅速于3000转离心10分钟分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,离心3000转30分钟后提取上清。
3. 细胞上清液:在3000转下离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水捣碎后,进行3000转离心10分钟提取上清。
5. 保存:如未能及时检测样本,应按单次使用量分装并冷冻存储于-20℃,为防止反复冻融,请在室温下解冻,并确保样品均匀完全解冻。
关于操作注意事项及试剂盒组成,需特别留意标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备:将20×洗涤缓冲液按1:20比例稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水。
洗板方法及操作步骤请参见具体操作手册,通过绘制标准曲线以确保结果的准确性。在Excel工作表中,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制线性回归曲线并按曲线方程计算样本浓度值。
本试剂盒的性能及使用免责声明强调,试剂盒的使用仅限于科学研究,确保您严格遵守相关规定。我们的品牌尊龙凯时致力于提供高质量的生物医疗产品,以支持您的研究工作。