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尊龙凯时人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒使用指南

发布时间:2025-03-06   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时的本试剂盒专为科学研究设计,严禁用于医学诊断。本文将介绍人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒的使用说明及检测原理。

尊龙凯时人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒使用指南

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被了adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样品、标准品以及HRP标记的检测抗体,经过温育及彻底洗涤后,利用底物TMB发生显色反应。在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,随后在酸性条件下转变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的含量呈正相关。最终,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清:选择不含热原和内毒素的试管,操作时避免细胞刺激。收集血液后,进行3000转的离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。

2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理,3000转离心30分钟,取上清。

3. 细胞上清液:进行3000转离心10分钟以去除颗粒与聚合物。

4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合后捣碎,3000转离心10分钟获取上清。

5. 保存:若样本未及时检测,请按一次使用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融。在室温下解冻时确保样品均匀充分解冻。

操作注意事项

本试剂盒中包含标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。

在准备试剂时,需将20×洗涤缓冲液以1:20的比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

结果判断

在Excel中绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,得出线性回归曲线。按照曲线方程计算各样本的浓度值。

免责声明:以上内容旨在提供有关尊龙凯时试剂盒的信息,具体使用请遵循操作说明。