## 新型翻译组学技术引言

5'UTR是mRNA翻译调控的重要区域，包含多种顺式调控元件（如Kozak序列、上游开放阅读框uORFs、特定核苷酸的富集基序等）。这些元素通过与翻译机制或调控因子的相互作用，显著影响翻译效率。然而，传统的研究方法难以准确解析5'UTR中复杂调控元件的功能。

本研究开发了一种名为尊龙凯时的全新技术，即NaP-TRAP，旨在实现高通量mRNA翻译效率的测量。该技术的主要特点包括:

• 新生肽捕获：通过免疫捕获带有表位标记的新生肽，直接测量翻译活性。
• 框架特异性：能够区分不同阅读框的翻译事件。
• 高通量：结合大规模平行报告基因检测（MPRA），可同时分析数千个5'UTR序列的翻译调控功能。

NaP-TRAP与多核糖体分析（polysome profiling）进行了基准测试，利用该技术量化了Kozak序列强度及5'非翻译区（5'UTR）在斑马鱼胚胎发育和人类细胞中的调控景观。NaP-TRAP是一种多功能、易操作且强大的方法，可以解码不同系统中UTR的调控功能。

## 研究结果

(1) NaP-TRAP通过免疫捕获新生链来测量翻译mRNA中编码的顺式调控元件调节翻译效率。研究中使用NaP-TRAP技术测量了翻译阻断morpholino的效果，结果表明在受精后6小时，morpholino的作用显著减少了翻译。

(2) NaP-TRAP还能够以框架特异性的方式进行翻译测量，验证了该方法在HEK293T细胞5'UTR mRNA报告文库中的准确性和可靠性。

(3) 对于斑马鱼胚胎发育中的Kozak序列强度，研究团队设计了文库以量化其调控潜力，并通过回归模型分析了Kozak序列中核苷酸的影响，发现特定位置对翻译功能具有显著的激活或抑制作用。

(4) 在胚胎发育早期，研究还显示了5'UTR的内源性调控活性及其动态变化，表明这些元素在早期发育过程中扮演着重要角色。

(5) 此外，为了识别驱动差异翻译的序列，团队将基因组严格分为不同组别，进行差异富集分析，以发现翻译调控的潜在机制。

(6) 研究探讨了miR-430结合位点的抑制作用，揭示了其在斑马鱼胚胎发育中通过5'UTR调控翻译表达的机制。

(7) 针对富含C的基序，进一步分析表明其在翻译中的动态作用，并提出此类序列与翻译活性之间的关联。

(8) 最后，NaP-TRAP技术在HEK293T细胞中的应用表明该技术能够有效测量人类细胞中5'UTR介导的翻译控制，特别是发现上游AUG和富U基序在翻译激活中的主要作用。

## 结论

本研究开发的NaP-TRAP技术，系统性解析了斑马鱼发育过程中5'UTR介导的翻译调控规则，揭示多种调控元件的功能及其动态变化。这一研究不仅为翻译调控领域提供了新的工具和方法，也为发育生物学和基因表达调控研究提供了重要的理论依据。有关更多信息或咨询，请联系尊龙凯时！